问:高效液相色谱分离法实验报告
- 答:目的:达到分离分析的目的。
原理:通过HPLC分清升离测定来对目标化合物的分析鉴定。
试剂:相关流动相,固定相等。
仪器:HPLC等。
实验步骤:装样,检物桐测,分析。
结论:测定出结果。
分析:对图谱罩正坦进行分析。
问:高效液相是什么原理?
- 答:HPLC原理就是利用固定相与流动相的极性的差异,而达到分离物质目的。
- 答:利用液、固色谱原理,将圆举组分用色谱柱事先分离,利用液、固棚枝分配原理,分离各组分,然后通过检定器检测,电脑橘和碧记录电信号,放大、计算,给出结果。
- 答:(一)高效液相色谱分析的流程
由泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系宴链统,然后输出,经流量与压力测量之后,导入进样器。被测物由进样器注入,并随流动相通过色谱柱,在柱上进行分离后进入检测器,检测信号由数据处理设备采集与处理,并记录色谱图。废液流入废液瓶。遇到码亩复杂的混合物分离(极性范围比较宽)还可用梯度控制器作梯度洗晌模孙脱。这和气相色谱的程序升温类似,不同的是气相色谱改变温度,
而HPLC改变的是流动相极性,使样品各组分在最佳条件下得以分离。 - 答:HPLC是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或庆中纳不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样培悉的分析。
给你介绍本书:实用高效液相色谱法的建立(第二版)
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实用高效液相色谱法的建立(第二版)以大量分析实例翔实地论述了HPLC方法建立的基本思路和策略。作者在说明采用HPLC分离分析实际样品的方法建立时,运用大量的具体实例,引用了众多有 价值的参考文献,并结合计算机模拟的方法说明了方法建立的基本模式。对于不同类型的样品和为不同分析目的的实际分离过程,作者采用循序渐进的方法,系统地 使读者逐步掌握誉没方法建立的要领。本书可作为色谱实验人员日常分析中的案头参考书,对于从事色谱理论和实验研究的科技人员也具有很高的参考价值。 - 答:正相扰运色谱法
反相色谱法
固定相极性
高粗早~中
中缓凳梁~低
流动相极性
低~中
中~高
组分洗脱次序
极性小先洗出
极性大先洗出
问:高效液相色谱(HPLC)系统适用性试验是指哪些内容?进行该试验的目的是什么?
- 答:一、在高效液相色谱法系统适用性试验中,有常用的四个内容:分离度、柱效、重复性和拖尾因子。
1、分离度(resolution,R)——相邻两峰的保留时间尺做渗之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度。R≥1.5称为完全分离。
2、柱效:色谱柱是色谱仪最重要的部件(心脏)。柱子内径一般为1~6 mm。常用的标准柱型是内径为4.6 或3.9mm ,长度为15 ~30cm 的直形不锈钢柱。填料颗粒度5 ~10μm ,柱效以理论塔板数计大胡举约 7000 ~10000。减小填料粒度和柱径以提高柱效。
3、拖尾因子(tailing factor,T),用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子或不对陵脊称因子。
二、目的:按各品种项下要求对仪器进行适用性试验,即用规定的对照品对仪器进行试验和调整,应达到规定的要求;或规定分析状态下色谱柱的最小理论板数、分离度和拖尾因子。
扩展资料
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。
LLPC与GPC有相似之处,即分离的顺序取决于K,K大的组分保留值大;但也有不同之处,GPC中,流动相对K影响不大,LLPC流动相对K影响较大。
参考资料来源: - 答:柱效(理论板数)、分离度(大于1.5)、拖尾滚昌虚因子(迅源0.95-1.05)三大燃项。
目的是衡量该色谱条件下的色谱系统(主要是柱子),是否适用于该方法。 - 答:理论板数,分离度,灵敏度,拖尾因子,重复性 五项指标