一、犬瘟热、细小病毒、腺病毒三联弱毒疫苗（论文文献综述）
巨敏莹[1]（2020）在《犬四种病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立》文中认为犬瘟热病毒（CDV）、犬副流感病毒（CPIV）、犬细小病毒（CPV）和犬腺病毒Ⅱ型（CAV-2）是引起犬常见传染病的主要病原体,给养犬业带来了严重经济损失。本研究根据四种病毒在GenBank中登录的序列,设计四条引物和四条TaqMan探针,通过优化反应条件以及敏感性、特异性和重复性试验,建立四种病毒单重TaqMan实时荧光定量PCR方法以及四重TaqMan实时荧光定量PCR方法。结果表明,四种病毒单重方法对CAV-Ⅱ、CPV、CPIV最小检出量均为101copies/μL,CDV最小检出量为102-101copies/μL,敏感性高;标准曲线线性关系良好,相关系数（R2）均大于0.990;四种病毒只在本病毒阳性模板有扩增信号,特异性强。CPV和CAV-Ⅱ两种病毒组内和组间变异系数均小于2%,CPIV和CDV两种病毒组内和组间变异系数均小于3%,重复性良好。检测了 72份样品结果均能特异性检测出四种病毒。四重方法的敏感性,CAV-Ⅱ和CDV可以达到102copies/μL,CPV和CPIV可以达到103 copies/μL,敏感性较高;标准曲线线性关系良好,相关系数（R2）均大于0.990。不同病毒之间无交叉反应且仅有阳性模板有扩增信号,特异性强。四种病毒组内和组间变异系数均小于5%,重复性良好。检测了 26份样品,同时与普通PCR方法进行复核结果一致。表明所建立的四重TaqMan荧光定量PCR检测方法具有快速、敏感、稳定等优点,可以用于四种病毒的定量检测。
赵国清[2]（2019）在《威海地区主要毛皮动物常见病原体检测及微生态防治》文中提出水貂、狐狸、貉子是具有较高利用价值的毛皮动物。威海市毛皮动物养殖量位居全国地级市前列。本实验主要对威海地区的水貂、狐狸、貉子感染犬瘟热病毒、细小病毒、阿留申病毒及常发细菌病等进行了病原体检测,提出了微生态防控措施。1.对威海区域内毛皮动物养殖场,通过查阅档案、实地走访和填写调查问卷相结合的方法进行调查,掌握养殖、防疫、免疫以及主要疫病存在情况。结果表明,毛皮动物存栏量下降较大,存栏500只以上养殖场饲养量所占比重,水貂、狐狸比重约为50%,貉子比重约为20%。导致毛皮动物发病的病毒性病原主要是犬瘟热病毒、细小病毒、阿留申病毒、伪狂犬病毒、狐狸脑炎病毒等;细菌性病原主要是绿脓杆菌、沙门菌、巴氏杆菌、肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、肺炎双球菌、魏氏梭菌等细菌。2.对存栏5000只以上的毛皮动物养殖场随机采集病料,共采集140份样品（分别采集肝、肺、肾、脾、肠、脑）。对样本分别进行病理解剖、病毒检测、细菌检测。结果显示,犬瘟热病毒的感染率约27.14%,细小病毒的感染率为20.71%,阿留申病毒未检出,大肠杆菌的感染率为21.42%,克雷伯氏菌的感染率为15%,沙门氏菌的感染率为10.71%,支气管败血波氏杆菌的感染率为2.14%,绿脓杆菌的感染率为11.42%。犬瘟热病毒、细小病毒、大肠杆菌、克雷伯氏菌、沙门氏菌、支气管败血波氏杆菌、绿脓杆菌7种病原的单纯感染、二重感染、三重感染的感染率分别为30%、30.71%、5.71%。水貂的致病菌感染率比狐狸、貉子更高。3.血清学分型结果显示:大肠杆菌O88是主要的流行血清型,占检出血清型的33.3%;G型绿脓杆菌是主要流行菌株,占检出血清型的35.7%。药敏试验结果显示,感染性细菌对氨苄西林等青霉素类、头孢唑林等一、二代头孢菌素、复方新诺明、呋喃妥英等的耐药率较高;比较敏感的药物有:头孢他啶、头孢吡肟等三、四代头孢菌素,妥布霉素,左氧氟沙星,哌拉西林/他唑巴坦等含有β-内酰胺酶抑制剂的药物。4.对分离到的CDV和MEV株的基因进行了测序,分离到的2株CDV的核苷酸同源性为99.8%,与6株参考毒株的核苷酸同源性为98.1%99.1%,分离到的病毒同属于Asia-I型;分离到的3株MEV的核苷酸同源性为99.7%100%,3株毒株基因与28株参考毒株的基因同源性为97.3%99.1%,分离的细小病毒与CPV位于同一进化分支上。5.为了研究饲料中添加益生菌制剂对水貂免疫功能的影响。试验采用单因素完全随机设计试验,选择60日龄雄性水貂随机分为4组,每组3个重复,每个重复5只,Ⅰ组为空白对照组饲喂基础日粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在基础日粮中添加0.5%、1.0%、1.5%益生菌制剂,试验期60 d,试验结束测定其免疫指标。结果表明,在基础饲料中添加益生菌制剂可以提高水貂的免疫功能。本调查揭示了威海地区主要毛皮动物感染性疾病的主要病原及其特性,找出了致病原的多重感染的发病规律,阐明了主要细菌病的病原耐药性,为威海地区毛皮动物疾病的诊断与防治提供了基础。
郑颖,范泉水[3]（2018）在《犬瘟热预防生物制剂研究进展》文中认为犬瘟热（canine distember,CD）呈世界性分布,且在不同物种间可交叉感染,所以难以完全消灭,对犬瘟热尚无特效的治疗药物和方法,疫苗接种是惟一有效的防制措施。自Puntoni首次用犬瘟热病毒感染犬脑组织的福尔马林灭活苗以来,相继研制出不同类型的犬瘟热病毒灭活苗、麻疹病毒异源苗和犬瘟热病毒弱毒疫苗。防制犬瘟热需要使用安全性、免疫力持久的疫苗,而常规疫苗都在不同程度上存在着
文兆海[4]（2018）在《狂犬病疫苗株与减毒疫苗株的免疫及病理学研究》文中进行了进一步梳理狂犬病（Rabies）是由狂犬病病毒感染引起的一种急性致死性人兽共患传染病,一旦发病死亡率几乎为100%。犬瘟热、犬细小亦是造成犬科动物发病死亡的重要传染病。目前,疫苗接种是预防狂犬病、犬瘟热、犬细小最为经济有效的方法。本研究团队利用反方向遗传学技术将狂犬病病毒的G基因提前,敲除其毒力基因,并将犬瘟热病毒和犬细小病毒的主要抗原基因CDV-N、CPV-VP2插入到狂犬病病毒基因组构建重组狂犬病病毒,有望获得基因重排减毒狂犬病疫苗株、犬瘟热病毒N基因重组狂犬病病毒的二联弱毒苗株、犬瘟热病毒N基因-犬细小病毒VP2基因重组狂犬病病毒的三联弱毒苗株。以期为将来制备狂犬病减毒口服活疫苗、犬瘟热-狂犬病二联口服弱毒活疫苗、犬瘟热-犬细小-狂犬病三联弱毒活疫苗奠定基础。首先,为了探究基因重排减毒狂犬病病毒、犬瘟热病毒N基因重组狂犬病病毒（CDV-N重组狂犬病病毒）的拯救及鉴定。利用反向遗传学技术,通过脂质体转染的方法,将纯化后的全长重组质粒与4个辅助性表达质粒共转染BSR细胞;通过RT-PCR技术、间接免疫荧光试验对重组病毒进行鉴定。结果显示,RT-PCR检测出现与预期相符的目的片段;激光共聚焦显微镜观察发现,试验组出现了大量的荧光灶点,空白对照组未见绿色荧光;间接免疫荧光鉴定结果与RT-PCR检测结果相符,表明基因重排减毒狂犬病病毒、CDV-N重组狂犬病病毒拯救成功。其次,探究基因重排减毒狂犬病病毒、CDV-N重组狂犬病病毒、CDV-N-CPV-VP2重组狂犬病病毒对小鼠的免疫效果及安全性评估。利用ELISA试剂盒对狂犬病毒、犬瘟热病毒的特异性抗体进行检测。结果显示:三种重组狂犬病病毒株口服免疫产生的狂犬病毒抗体水平均显着高于亲本毒株Srv9口服免疫组。CDV-N重组狂犬病病毒、CDV-N-CPV-VP2重组狂犬病病毒均可刺激小鼠机体产生狂犬病毒抗体和犬瘟热病毒抗体;病理组织学检查结果表明口服免疫组的安全性优于注射免疫组。最后,探究了基因重排减毒狂犬病病毒、CDV-N重组狂犬病病毒、CDV-N-CPV-VP2重组狂犬病病毒对犬的口服免疫效果。利用ELISA试剂盒对狂犬病毒、犬瘟热病毒、犬细小病毒的特异性抗体进行定量检测。结果显示均能诱发机体产生其特异性抗体,且到第35天时各免疫组血清狂犬病毒抗体水平均高于世界卫生组织推荐的最低保护水平0.5 IU。
唐毓[5]（2018）在《犬细小病毒的分离鉴定及其抗体检测间接凝集试验的建立》文中提出犬细小病毒病（Canine parvovirus disease）是由犬细小病毒（CPV）引起犬的一种急性传染病,该病在临床上主要表现为发热、呕吐、出血性肠炎、白细胞减少和幼犬心肌炎。目前,免疫接种是防治该病的主要措施。近年来,由于疫苗抗原性差异,幼犬母源抗体干扰,免疫犬抗体水平过低导致免疫失败,引发CPV感染的报道不断出现。因此,定期分离当地的CPV流行毒株,分析其抗原性遗传演变情况,及时了解幼犬CPV母源抗体水平和免疫犬抗体水平,确定最佳的疫苗免疫时机,对于犬细小病毒的防控具有重要意义。本研究将临床疑似感染CPV的病犬排泄物处理后接种F81细胞,传代培养后,经电镜观察、间接免疫荧光技术、PCR、血凝（HA）鉴定确定分离获得1株CPV病毒,命名为CPV-DN17-1。克隆CPV分离株VP2基因,测序结果与GenBank中收录的CPV疫苗株、国内外分离株等24株CPV VP2序列进行比对分析,结果显示,分离株与疫苗株同源性存在差异,核苷酸同源性为95.6%98.8%;与国内外分离株差异不大,核苷酸同源性为98.7%99.8%;与HRB-e2（哈尔滨分离株）氨基酸同源性为100%,其它毒株为97.9%99.4%。系统进化树分析结果显示,病毒分离株与疫苗株、国外分离株、其它种属细小病毒亲缘关系均较远,与国内分离株较近,表明分离株不是来源于疫苗株。与CPV参考株的氨基酸序列比对显示,分离株基因型为new CPV-2a型;分离株与疫苗株相比较,主要抗原表位区氨基酸没有明显的改变。本研究根据DNAStar-Protein软件分析以及参考相关文献,在CPV-DN17-1的VP2基因主要抗原表位编码区设计并合成两对引物sVP2-F1/R1和sVP2-F2/R2,克隆并构建了重组质粒pGEX-VP2-S1和pGEX-VP2-S2。诱导、表达和鉴定后的重组蛋白命名rVP2-S1和rVP2-S2。用重组蛋白制备的多克隆抗体经ELISA、中和试验检测,rVP2-S1的间接ELISA效价为1:12800,中和效价为1:128;rVP2-S2的间接ELISA效价为1:6400,中和效价为1:54。选择免疫原性更好的rVP2-S1致敏红色聚苯乙烯羧基纳米微球,对致敏蛋白浓度、致敏缓冲液、EDC含量等致敏条件的优化结果表明,当纳米微球为25μL（5%w/v）,致敏蛋白量0.3 mg,EDC 0.015 g,醋酸缓冲液500μL时,致敏的彩色微球与兔抗CPV阳性血清凝集效果最佳。凝集结果经试剂盒标定,判定标准为能使致敏微球发生50%（++）以上凝集的血清为阳性血清,该血清抗体对犬有免疫保护作用;低于50%凝集为阴性结果,血清抗体无免疫保护作用。试验证明该方法特异性、敏感性、重复性和稳定性良好。利用建立的检测方法和试剂盒同时对临床采集的40份犬血清进行检测,符合率为97.5%。本研究所建立的CPV抗体检测间接凝集试验具有良好的特异性、敏感性、稳定性,可满足临床对单份血清的检测需求,具有明显的应用价值。
苏瑞红[6]（2018）在《犬瘟热病毒的分离鉴定及其抗体检测间接凝集试验的建立》文中研究指明犬瘟热病毒（Canine Distemper Virus,CDV）是引起狐、貂、貉等毛皮动物及犬、熊猫、虎等动物犬瘟热的病原。以宠物犬来说,目前,接种疫苗是防治该病的主要措施。由于疫苗抗原性差异、高水平母源抗体或免疫犬血清抗体的干扰,往往造成免疫失败而引起犬瘟热的发生,或因血清抗体水平过低不能提供保护作用而发病。合理的免疫时机应以抗体水平检测结果为基础。临床上应用的抗体检测方法有ELISA、血清中和试验、间接免疫荧光试验等,这些方法快速、准确、便于检测大量样品。但这些检测方法操作较复杂或需要特殊仪器,可能会影响宠物犬母源抗体和免疫抗体检测的普及率。因此,定期分离CDV现地流行毒株,分析其抗原性遗传演变情况,选择抗原性一致的疫苗免疫接种;建立一种简便、经济、能够及时检测单份血清样品的CDV血清抗体检测方法,对有效预防犬瘟热具有重要意义。本研究将临床确诊为CDV病死犬的肠内容物处理液接种MDCK细胞,经传代培养后,通过电镜观察、间接免疫荧光检测、RT-PCR鉴定后确定分离获得了1株CDV,命名为CDVDN17-1。对分离毒株H基因的核苷酸序列分析结果显示,与HeB（09）3毒株H基因核苷酸同源性最高（99.8%）,与临床常用CDV疫苗株Rockborn同源性最高（96.1%）。H基因系统进化树分析结果显示,与HeB（09）3毒株亲缘关系最近,属于Asia-1型。用常规疫苗免疫犬血清与分离病毒进行中和试验,结果显示,当前疫苗毒株的免疫抗体对分离病毒有中和作用。根据对CDV-DN17-1 H基因序列分析,本研究克隆了H基因两段抗原区域片段,原核表达获得了两种重组蛋白rCDV-SDH1和rCDV-SDH2,并分别免疫实验兔制备了抗血清。血清中和试验结果显示,用rCDV-SDH1制备的血清抗体中和效价为1:35,高于rCDV-SDH2制备的血清抗体,因此选择rCDV-SDH1作为凝集试验的检测抗原。经偶联条件优化,将纯化的rCDV-SDH1与红色羧化聚苯乙烯纳米微球偶联,制备了致敏免疫彩色纳米微球。以致敏微球为凝集原,CDV阳性血清为凝集素,经特异性、敏感性和稳定性试验验证,建立了CDV抗体检测间接凝集试验。通过与商品化试剂盒对血清样品的检测结果对比分析,确定了间接凝集试验的阳性判定标准,即能使致敏微球发生凝集度为“++”的血清为阳性血清。该方法具有良好的特异性,只与CDV阳性血清发生凝集反应;试剂盒检测值S≥3的阳性血清,凝集试验结果均为阳性;4℃保存13个月的致敏微球与阴性、阳性血清的凝集结果无变化。初步对40份临床血清样品的检测结果显示,本研究建立的间接凝集试验与试剂盒的检测结果一致。本研究从感染CDV病死犬肠内容物中分离到1株CDV,初步分析了当前流行毒株H基因的变异情况,为疫苗的选择提供了参考;建立的CDV抗体检测间接凝集试验,操作简便,特异性良好,结果易于判定,不仅可以用于大量样品的集中检测,也可以针对宠物门诊单份血清样品随时检测,便于推广应用。
王璐[7]（2018）在《携带有犬瘟热与犬细小病毒抗原的腺相关病毒载体疫苗的构建》文中进行了进一步梳理犬瘟热病毒与犬细小病毒可以引起犬科、鼬科、大熊猫科等动物的烈性传染疾病,引起动物的死亡率可高达80%,给我国宠物饲养业、皮毛动物饲养业、野生动物保护领域均带来了严重的经济损失。目前国内外主要使用犬瘟热与犬细小病毒的弱毒疫苗对疾病进行防控,但该种类疫苗存在一些不足之处,例如生产成本比较高,弱毒疫苗具有毒力返强的隐患,面对不同的病毒变异株有其局限性等。本研究旨在构建一款高效安全低成本的新型疫苗。我们通过将犬瘟热与犬细小病毒的抗原基因插入到腺相关病毒（Adeno associated virus,AAV）基因组中,制备成可预防犬瘟热与犬细小疾病的腺相关病毒重组疫苗。本课题首先选择犬瘟热病毒的血凝蛋白基因、融合蛋白基因和犬细小病毒的衣壳蛋白基因作为抗原基因,并分别插入到腺相关病毒基因组中。再通过腺相关病毒三质粒包装系统获得携带各抗原基因的重组腺相关病毒（Recombinant adeno-associated virus,rAAV）。经病毒滴度检测与外源蛋白表达检测后,将携带有犬瘟热与犬细小病毒抗原基因的rAAV混合,通过肌肉注射免疫6周龄的Balb/c小鼠,同时以英特威犬二联疫苗作为阳性对照,以rAAV-GFP病毒作为阴性对照。在首次免疫实验中,按照英特威犬二联疫苗的免疫程序免疫,即对小鼠进行三次免疫,每次免疫间隔14 d。免疫程序结束后每隔14 d对小鼠进行采血与中和抗体的检测。我们得到了良好的实验结果,之后为了进一步验证rAAV疫苗的高效性,按照与三次免疫实验相同的免疫途径与免疫剂量对实验小鼠进行一次免疫实验,免疫后继续监测中和抗体水平。三次免疫结果显示rAAV疫苗可以使小鼠产生高水平的中和抗体。在免疫后所有时间点中rAAV疫苗使小鼠产生的抗犬瘟热病毒中和抗体效价均高于阳性对照,最高时中和抗体效价大于1:500,是阳性对照的4倍。但在免疫后的所有时间点中,rAAV疫苗使小鼠产生的抗犬细小病毒中和抗体效价均与阳性对照接近,中和抗体效价均在1:100到1:200之间,一般认为当中和抗体效价大于1:100时机体便可以免受强毒的攻击。一次免疫结果显示rAAV疫苗依然可以使小鼠产生高水平的中和抗体。在免疫后第6周rAAV疫苗使小鼠产生的抗犬瘟热病毒中和抗体效价超过1:100,然而阳性对照产生的抗犬瘟热病毒中和抗体效价始终小于1:100,理论上我们认为阳性对照免疫失败,在免疫后第8周rAAV疫苗与阳性对照使小鼠产生的抗犬细小病毒中和抗体效价均超过1:100。在此次免疫实验中显示,rAAV疫苗仅需要对动物进行一次免疫,理论上就可以达到对动物的有效免疫。本研究的结果表明:rAAV疫苗可以激发小鼠的免疫系统并产生高水平的中和抗体;rAAV疫苗仅需对动物进行一次免疫在理论上就可以达到对动物的有效免疫;rAAV疫苗针对于犬瘟热病毒和犬细小病毒产生的免疫效果不平衡,针对于犬瘟热病毒的免疫效果强于针对犬细小病毒的免疫效果,这种现象可能是由抗原的选择、rAAV病毒混合的比例与滴度等原因造成的,可在后续工作中继续摸索病毒配比条件以更好的平衡针对两种病毒的免疫效果。综上所述携带有犬瘟热与犬细小病毒抗原基因的腺相关病毒重组疫苗具有安全高效、缩短免疫周期、成本低廉等优势,有望成为有效防控犬瘟热与犬细小疾病的新型疫苗。
薛向红,胡博,赵建军,刘昊,徐淑娟,闫喜军[8]（2015）在《犬瘟热疫苗研究进展》文中指出犬瘟热（CD）是由犬瘟热病毒（CDV）感染犬和其他食肉动物引起的一种病死率高的接触性传染病。近年来暴发了多起犬和野生动物自然感染犬瘟热病毒的案例。目前尚无治疗犬瘟热的有效药物或生物制剂。犬瘟热的预防主要依靠接种疫苗,应用最为广泛的是弱毒活疫苗,但也存在一些问题。论文主要概述了犬瘟热弱毒活疫苗、基因疫苗、病毒载体疫苗的研究进展,以期为研制安全、高效的犬瘟热新疫苗提供参考。
刘大飞[9]（2015）在《犬瘟热、细小病毒病、腺病毒病（Ⅰ型）三联活疫苗的研制》文中进行了进一步梳理犬瘟热（Canine distemper, CD）、犬细小病毒（Canine parvovirus, CPV）病及犬腺病毒（Canine adenovirus, CAV）病是当前对我国养犬业危害严重的3种病毒性传染病。常引起大批犬、貂和狐等动物发病,经济损失惨重。犬瘟热病毒（Canine distemper virus, CDV）可以感染包括大熊猫、小熊猫以及狮、虎、豹等食肉目所有8个科、灵长目的猕猴属、偶蹄目猪科和鳍足目海豹科等多种动物。CPV可引起犬出血性肠炎与心肌炎,此外,CPV还可引起虎、狮、果子狸和猴等野生动物的感染。CAV不仅流行于我国和世界各地家养的犬、狐中,而且广泛地流行于野生的狐、熊、郊狼和浣熊等动物中。疫苗免疫被认为是犬病防控的最直接有效措施。当前,广泛应用的主要有单价或多价弱毒苗。虽然对于防控犬的重大疫病起到了积极作用,但是还时有疫情发生的报道。同时,目前使用的这些的疫苗大部分为国外疫苗的复制品,其使用的疫苗株与我国优势流行株之间抗原差异显着。因此,研制适合国内流行毒株的疫苗已迫在眉睫。鉴于此,开展以下研究：CDV、CPV及CAV的分离鉴定：将发病犬的病料组织等经过处理后,分别接种鸡胚成纤维细胞（Chicken embryo fibroblast, CEF）、 CRFK及MDCK细胞进行传代培养,并进行病毒形态学、PCR及动物回归试验鉴定等一系列鉴定。CDV、CPV及CAV的细胞培养物上清电镜观察分别可见典型的副黏病毒粒子、细小病毒粒子和腺病毒粒子。动物回归试验显示,三种分离株分别可导致犬出现明显的相应的临床症状。PCR和序列分析进一步确定分离株分别为CDV、CPV和CAV的野毒株,并分别命名为CDV-YB、CPV-YN和CAV-H。CDV、CPV及CAV的致弱研究：CDV-YB株分别经CEF、Vero和CEF细胞连续传70、20和15代,CPV-YN和CAV-H分别经CRFK和MDCK细胞连续传至110代,病毒滴度逐渐提高并分别稳定在1065 TCID50/mL、106 TCID50/mL和1075 TCID50/mL左右。并且三种病毒对犬的致病力随着传代次数的增加而逐渐降低。动物回归试验结果进一步表明成功获得致弱毒株,分别命名为CDV-YBR、CPV-YNR和CAV-HR。CDV、CPV及CAV致弱毒株的免疫原效力评价；分别将三种致弱毒株免疫犬,并用亲本强毒株进行攻毒保护试验,结果表明三种致弱毒株均可诱导犬产生理想的中和抗体,并对同源强毒株的攻击提供完全保护。CD、CPV病及CAV病（Ⅰ型）三联活疫苗研制：将致弱毒株CDV-YBR、CPV-YNR和CAV-HR按照比例混匀,加入稳定剂制备三联弱毒疫苗,并对其开展免疫学评价。结果表明：三联活疫苗具有良好的安全性和免疫性原性。与相应单苗相比,二者在免疫效力方面无明显差异。与同类商品化五联活疫苗相比,两者在安全性基本一致；本研究中三联苗在免疫效力方面略胜一筹；在病毒含量和免疫持续期方面均优于商品化疫苗；此外对怀孕母犬进行免疫具有绝对的安全优势。目前,国内应用的弱毒联苗一部分是国外疫苗的复制品,另一部分疫苗种毒直接来自于国外,这与国内目前流行的野毒株在基因水平和抗原性等生物学特性方面存在显着差异,而且,目前商品化疫苗均不适合于怀孕母犬的免疫。而本研究三联弱毒苗的疫苗株均来源于国内优势流行株经致弱而成,有独立知识产权,且制备的疫苗具有良好的安全性和免疫原性,并对怀孕母犬绝对安全。该三联苗已申报新兽药批号,目前处于复核试验阶段。本研究填补了我国犬类国产疫苗的空白,为我国犬的重要病毒病的防控提供了物质基础和技术储备,并将产生良好的经济效益和社会效益。
王凯民,姜焱,唐泰山,张常印[10]（2013）在《犬细小病毒病研究进展》文中研究说明犬细小病毒病是由犬细小病毒（Ca|1ine parvovirus,CPV）感染幼犬引起的一种急性传染病,以剧烈的呕吐、出血性肠炎和白细胞显着减少以及心肌炎为主要特征,发病率高,传染性强,死亡率高,是危害我国养犬业最为严重的传染病之一,可造成严重的经济损失。1977年,美国学者Engster和Naim最先从患出血性肠炎的犬粪便中分离得到该病毒。该病毒对犬的感染危害严重,世界各国对该病毒生物学特性及其疫病的防制进行了大量的研究工作。本文就病原生物学特性及其基因组结构、流行病学、发病机理及病理变化、临床症状、疫苗研发以及病原的检测方法等方面的研究进展进行概述。
二、犬瘟热、细小病毒、腺病毒三联弱毒疫苗（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、犬瘟热、细小病毒、腺病毒三联弱毒疫苗（论文提纲范文）
（1）犬四种病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立（论文提纲范文）
| 研究项目资助说明 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 1 引言 |
| 1.1 犬瘟热概述 |
| 1.1.1 犬瘟热病毒 |
| 1.1.2 犬瘟热的流行病学 |
| 1.2 犬副流感概述 |
| 1.2.1 犬副流感病毒 |
| 1.2.2 犬副流感的流行病学 |
| 1.3 犬传染性肝炎概述 |
| 1.3.1 犬腺病毒 |
| 1.3.2 犬传染性肝炎的流行病学 |
| 1.4 犬细小病毒病概述 |
| 1.4.1 犬细小病毒 |
| 1.4.2 犬细小病毒病的流行病学 |
| 1.5 病毒的检测方法 |
| 1.5.1 病毒分离鉴定 |
| 1.5.2 血清学检测 |
| 1.5.3 分子生物学检测 |
| 1.6 本研究相关病毒PCR方法的研究 |
| 1.7 本研究的目的及意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 病毒核酸及检测样品 |
| 2.1.2 主要试剂及仪器设备 |
| 2.1.3 溶液配制 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 CDV、CPV、CAV-Ⅱ、CPIV引物探针设计与合成 |
| 2.2.2 四种病毒单重荧光定量PCR方法的建立 |
| 2.2.3 四重荧光定量PCR方法的建立 |
| 3 结果 |
| 3.1 四种病毒单重荧光定量PCR方法建立 |
| 3.1.1 四种病毒质粒标准品制备结果 |
| 3.1.2 四种病毒单重荧光定量PCR反应体系和条件优化结果 |
| 3.1.3 四种病毒单重荧光定量PCR标准曲线建立结果 |
| 3.1.4 四种病毒单重荧光定量PCR敏感性试验结果 |
| 3.1.5 四种病毒单重荧光定量PCR的重复性试验结果 |
| 3.1.6 四种病毒单重荧光定量PCR的特异性试验结果 |
| 3.1.7 四种病毒单重荧光定量PCR样品检测结果 |
| 3.2 四重荧光定量PCR方法建立结果 |
| 3.2.1 四重荧光定量PCR反应体系优化结果 |
| 3.2.2 四重荧光定量PCR反应标准曲线建立 |
| 3.2.3 四重荧光定量PCR反应敏感性试验结果 |
| 3.2.4 四重荧光定量PCR重复性试验结果 |
| 3.2.5 四重荧光定量PCR特异性试验结果 |
| 3.2.6 四重荧光定量PCR样品检测结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（2）威海地区主要毛皮动物常见病原体检测及微生态防治（论文提纲范文）
| 摘要 |
| SUMMARY |
| 缩略语表 |
| 第一章 毛皮动物主要病毒性传染病研究进展 |
| 1.1.犬瘟热研究进展 |
| 1.1.1.CDV的分类与形态结构 |
| 1.1.2.CDV基因组编码蛋白及其功能 |
| 1.1.3.CDV的流行病学 |
| 1.1.4.CDV的临床症状 |
| 1.1.5.CDV的诊断技术进展 |
| 1.1.6.CDV的防治研究进展 |
| 1.2.毛皮动物细小病毒病研究进展 |
| 1.2.1.细小病毒的分类 |
| 1.2.2.生物学差异 |
| 1.2.3.MEV的研究进展 |
| 1.2.4.细小病毒疫苗的研究进展 |
| 1.3.水貂阿留申病研究进展 |
| 1.3.1.AMDV的分类与形态结构 |
| 1.3.2.AMDV的分子生物学特性 |
| 1.3.3.AMDV的流行病学与临床症状 |
| 1.3.4.AMDV的检测技术进展 |
| 1.3.5.ADM的综合防治措施 |
| 第二章 毛皮动物主要细菌性疾病研究进展 |
| 2.1.大肠杆菌病研究进展 |
| 2.1.1.病原学 |
| 2.1.2.流行病学 |
| 2.1.3.临床症状与病理变化 |
| 2.1.4.防治措施 |
| 2.2.肺炎克雷伯氏菌病研究进展 |
| 2.2.1.病原学 |
| 2.2.2.流行病学 |
| 2.2.3.临床症状与病理变化 |
| 2.2.4.防治措施 |
| 2.3.绿脓杆菌病研究进展 |
| 2.3.1.病原学 |
| 2.3.2.流行病学 |
| 2.3.3.临床症状与病理变化 |
| 2.3.4.防治措施 |
| 第三章 威海地区主要毛皮动物养殖及疾病防治情况调查 |
| 3.1.材料与方法 |
| 3.1.1.调查范围 |
| 3.1.2.调查内容 |
| 3.1.3.调查途径 |
| 3.2.结果 |
| 3.2.1.养殖概况 |
| 3.2.2.防疫情况 |
| 3.2.3.常见疫病免疫情况 |
| 3.2.4.养殖用药情况 |
| 3.2.5.主要发病情况 |
| 3.3.讨论 |
| 3.3.1.养殖数量与密度的影响 |
| 3.3.2.不同饲养管理水平的影响 |
| 3.3.3.防疫措施的影响 |
| 3.3.4.疫苗免疫的因素 |
| 3.3.5.畜牧管理体制变动的影响 |
| 3.3.6.主要疾病传播流行特点 |
| 3.4.小结 |
| 第四章 威海地区主要毛皮动物大型养殖场常见病毒的PCR检测及序列分析 |
| 4.1.材料与方法 |
| 4.1.1.样品采集 |
| 4.1.2.主要实验试剂与仪器 |
| 4.1.3.样品的处理 |
| 4.1.4.核酸的提取 |
| 4.1.5.病毒性病原的检测 |
| 4.2.结果 |
| 4.2.1.病料剖检结果 |
| 4.2.2.CDV的检测结果 |
| 4.2.3.CDV的序列分析结果 |
| 4.2.4.MEV的检测结果 |
| 4.2.5.MEV的序列分析结果 |
| 4.2.6.AMDV的检测结果 |
| 4.2.7.感染统计结果 |
| 4.3.讨论 |
| 4.3.1.病毒性疾病持续流行 |
| 4.3.2.疫苗免疫保护出现漏洞 |
| 4.4.小结 |
| 第五章 威海地区主要毛皮动物大型养殖场病原菌的分离鉴定及药物敏感性试验 |
| 5.1.材料与方法 |
| 5.1.1.样品来源 |
| 5.1.2.主要实验试剂与仪器 |
| 5.1.3.样品剖检 |
| 5.1.4.细菌的分离培养 |
| 5.1.5.细菌的纯化与染色 |
| 5.1.6.生化鉴定与药敏试验 |
| 5.1.7.血清型鉴定 |
| 5.2.结果 |
| 5.2.1.病料剖检症状 |
| 5.2.2.细菌的分离及生化鉴定结果 |
| 5.2.3.分离菌的药敏实验结果 |
| 5.2.4.血清学分型统计结果 |
| 5.2.5.感染统计结果 |
| 5.3.讨论 |
| 5.3.1.病原种类多样,混合感染突出 |
| 5.3.2.条件性致病菌感染流行普遍 |
| 5.3.3.细菌耐药性需要加强关注 |
| 5.4.小结 |
| 第六章 饲料中添加益生菌制剂对水貂免疫功能的影响 |
| 6.1.材料与方法 |
| 6.1.1.实验材料 |
| 6.1.2.实验动物及饲粮 |
| 6.1.3.实验设计与饲养管理 |
| 6.1.4.免疫指标的测定 |
| 6.1.5.疫苗抗体的测定 |
| 6.1.6.试验数据统计 |
| 6.2.结果 |
| 6.2.1.益生菌制剂对水貂免疫指标的影响 |
| 6.2.2.益生菌制剂对水貂犬瘟热疫苗抗体的影响 |
| 6.3.讨论 |
| 6.4.小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 导师简介 |
（4）狂犬病疫苗株与减毒疫苗株的免疫及病理学研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 狂犬病病毒的基因组结构及基本特性 |
| 1.2 狂犬病流行病学 |
| 1.3 狂犬病发病机理 |
| 1.4 狂犬病的临床症状 |
| 1.5 狂犬病疫苗的研究 |
| 1.6 犬瘟热病毒概述 |
| 1.7 犬瘟热流行病学 |
| 1.8 犬瘟热发病机理 |
| 1.9 犬瘟热的临床症状 |
| 1.10 犬瘟热疫苗的研究 |
| 1.11 犬细小病毒概述 |
| 1.12 犬细小流行病学 |
| 1.13 犬细小发病机理 |
| 1.14 犬细小的临床症状 |
| 1.15 犬细小疫苗的研究 |
| 1.16 本论文研究目的及意义 |
| 第2章 基因重排减毒狂犬病病毒的拯救及遗传稳定性的研究 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 第3章 犬瘟热病毒N基因重组狂犬病病毒的拯救及其毒力的研究 |
| 3.1 材料 |
| 3.2 方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 第4章 狂犬病毒减毒苗、二联苗、三联苗对小鼠的免疫效果及病理学评估 |
| 4.1 材料 |
| 4.2 方法 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.4 讨论 |
| 第5章 狂犬病毒减毒苗、二联苗、三联苗对犬口服免疫效果的初步研究 |
| 5.1 材料 |
| 5.2 方法 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.4 讨论 |
| 第6章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 常用试剂的配制 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（5）犬细小病毒的分离鉴定及其抗体检测间接凝集试验的建立（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 引言 |
| 1.1 犬细小病毒病和犬细小病毒概述 |
| 1.1.1 犬细小病毒病 |
| 1.1.2 犬细小病毒 |
| 1.2 犬细小病毒病的免疫防治 |
| 1.2.1 犬细小病毒病疫苗及免疫程序 |
| 1.2.2 犬细小病毒病疫苗免疫抗体的检测方法 |
| 1.3 凝集试验 |
| 1.3.1 直接凝集试验 |
| 1.3.2 间接凝集试验 |
| 1.3.3 其他凝集试验 |
| 1.4 纳米微球及其在疾病检测领域的应用 |
| 1.4.1 纳米微球的分类 |
| 1.4.2 纳米微球在疾病检测领域的应用 |
| 1.5 研究目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物、细胞系及质粒 |
| 2.1.2 病毒分离样品、阳性血清、CPV疫苗株 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.1.4 主要仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 引物设计及合成 |
| 2.2.2 CPV分离鉴定 |
| 2.2.3 分离病毒VP2基因分析 |
| 2.2.4 CPVVP2重组基因的克隆与表达 |
| 2.2.5 CPV抗体检测间接凝集试验的建立 |
| 3 结果 |
| 3.1 CPV分离鉴定 |
| 3.1.1 病毒分离 |
| 3.1.2 PCR鉴定 |
| 3.1.3 血凝效价 |
| 3.1.4 电镜观察 |
| 3.1.5 间接免疫荧光鉴定 |
| 3.2 CPVVP2基因的序列分析 |
| 3.2.1 CPVVP2基因克隆鉴定 |
| 3.2.2 CPV分离株VP2基因序列分析 |
| 3.2.3 CPV分离株亚型分析 |
| 3.2.4 抗原表位差异性分析 |
| 3.2.5 TCID50测定 |
| 3.2.6 CPV分离株中和效价检测 |
| 3.3 重组CPVVP2蛋白的原核表达 |
| 3.3.1 重组CPVVP2基因的克隆及鉴定 |
| 3.3.2 重组CPVVP2质粒的构建及鉴定 |
| 3.3.3 重组CPVVP2蛋白的表达 |
| 3.3.4 重组蛋白的纯化及鉴定 |
| 3.4 CPV抗体检测间接凝集试验的建立 |
| 3.4.1 聚苯乙烯微球致敏条件的优化 |
| 3.4.2 间接凝集试验阳性判定标准的确立 |
| 3.4.3 CPV抗体间接凝集试验的特异性 |
| 3.4.5 CPV抗体检测间接凝集试验的重复性和稳定性试验 |
| 3.4.6 CPV疫苗免疫犬血清抗体检测 |
| 3.4.7 间接凝集试验的初步应用 |
| 4 讨论 |
| 4.1 CPV的分离鉴定 |
| 4.2 CPVVP2重组蛋白的表达及选择 |
| 4.3 纳米微球致敏条件优化 |
| 4.4 间接凝集试验的判定标准的确定 |
| 5 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
（6）犬瘟热病毒的分离鉴定及其抗体检测间接凝集试验的建立（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 引言 |
| 1.1 犬瘟热和犬瘟热病毒概述 |
| 1.1.1 犬瘟热 |
| 1.1.2 犬瘟热病毒形态和理化特性 |
| 1.1.3 犬瘟热病毒分类及其基因组结构 |
| 1.1.4 犬瘟热病毒的分离培养 |
| 1.1.5 犬瘟热病毒的鉴定 |
| 1.2 犬瘟热的防治 |
| 1.2.1 犬瘟热疫苗免疫接种 |
| 1.2.2 犬瘟热临床治疗 |
| 1.3 犬瘟热疫苗免疫抗体的检测方法 |
| 1.3.1 血清中和试验(SN) |
| 1.3.2 酶联免疫吸附试验(ELISA) |
| 1.4 凝集试验 |
| 1.4.1 直接凝集试验 |
| 1.4.2 间接凝集试验 |
| 1.5 纳米微球在疾病检测领域的应用 |
| 1.5.1 纳米微球的种类 |
| 1.5.2 纳米微球在疾病检测领域的应用 |
| 1.5.3 纳米微球致敏技术 |
| 1.6 研究目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 菌毒株、质粒、实验动物 |
| 2.1.2 主要试剂、培养基和耗材 |
| 2.1.3 病料和血清 |
| 2.1.4 实验仪器 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 犬瘟热病毒的分离鉴定 |
| 2.2.2 犬瘟热病毒H基因克隆及序列分析 |
| 2.2.3 犬瘟热疫苗免疫犬血清抗体检测 |
| 2.2.4 重组CDVH蛋白的表达 |
| 2.2.5 重组蛋白的纯化 |
| 2.2.6 重组蛋白的Western-blot鉴定 |
| 2.2.7 重组蛋白免疫原性比较 |
| 2.2.8 CDV抗体检测间接凝集试验的建立 |
| 2.2.9 CDV抗体检测间接凝集试验的初步应用 |
| 3 结果 |
| 3.1 CDV分离鉴定 |
| 3.1.1 细胞病变 |
| 3.1.2 电镜观察 |
| 3.1.3 RT-PCR鉴定 |
| 3.1.4 间接免疫荧光鉴定 |
| 3.2 CDVH基因克隆及序列分析 |
| 3.2.1 CDVH基因的扩增 |
| 3.2.2 CDVH基因核苷酸序列分析 |
| 3.2.3 CDVH基因氨基酸的序列分析 |
| 3.2.4 H蛋白的糖基化位点预测 |
| 3.2.5 分离毒株与疫苗毒株H蛋白抗原表位分析 |
| 3.3 CDV疫苗免疫犬血清抗体检测 |
| 3.3.1 CDVTCID_(50)测定 |
| 3.3.2 免疫犬血清中和试验 |
| 3.3.3 商品试剂盒检测犬血清抗体 |
| 3.4 重组CDVH蛋白的表达 |
| 3.4.1 CDVH基因的分段克隆 |
| 3.4.2 重组菌的构建 |
| 3.4.3 重组蛋白的表达 |
| 3.5 重组蛋白的纯化和免疫原性鉴定 |
| 3.5.1 重组蛋白的纯化 |
| 3.5.2 Western-blot免疫原性鉴定 |
| 3.6 重组蛋白免疫原性比较 |
| 3.6.1 免疫抗体检测 |
| 3.6.2 细胞中和试验 |
| 3.7 CDV抗体检测间接凝集试验的建立 |
| 3.7.1 聚苯乙烯微球致敏条件优化 |
| 3.7.2 CDV抗体检测间接凝集试验阳性标准确立 |
| 3.7.3 凝集反应的特异性和敏感性试验 |
| 3.7.4 凝集反应的重复性和稳定性试验 |
| 3.7.5 犬瘟热病毒抗体检测间接凝集试验的初步应用 |
| 4 讨论 |
| 4.1 犬瘟热病毒分离病料选取 |
| 4.2 犬瘟热病毒的细胞分离培养 |
| 4.3 犬瘟热毒株的遗传变异 |
| 4.4 用于致敏纳米微球的重组蛋白的选择 |
| 4.5 间接凝集试验检测犬血清抗体的应用前景 |
| 5 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
（7）携带有犬瘟热与犬细小病毒抗原的腺相关病毒载体疫苗的构建（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表(Abbreviation) |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 犬瘟热病毒研究进展 |
| 1.1.1 犬瘟热病毒流行概述与病理特征 |
| 1.1.2 犬瘟热病毒病原学特征 |
| 1.1.3 犬瘟热病毒的诊断 |
| 1.1.4 犬瘟热病毒疫苗研究现状 |
| 1.2 犬细小病毒研究进展 |
| 1.2.1 犬细小病毒流行概述与病理特征 |
| 1.2.2 犬细小病毒病原学特征 |
| 1.2.3 犬细小病毒的诊断 |
| 1.2.4 犬细小病毒疫苗研究现状 |
| 1.3 腺相关病毒研究进展 |
| 1.3.1 腺相关病毒生物学特征 |
| 1.3.2 腺相关病毒的应用 |
| 第2章 目的与意义 |
| 第3章 实验材料与方法 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 质粒、病毒、细菌、细胞、疫苗 |
| 3.1.2 实验动物 |
| 3.1.3 实验仪器及耗材 |
| 3.1.4 主要的工具酶,抗体,试剂以及血清 |
| 3.1.5 主要的培养基、抗生素、缓冲液及其配置 |
| 3.1.6 主要的生物学软件 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 氯化钙法制备大肠杆菌感受态 |
| 3.2.2 相关引物的设计与合成 |
| 3.2.3 犬瘟热病毒的培养 |
| 3.2.4 犬瘟热病毒TCID50检测 |
| 3.2.5 犬细小病毒的培养 |
| 3.2.6 犬细小病毒TCID50检测 |
| 3.2.7 犬瘟热病毒H基因与F基因的获得 |
| 3.2.8 携带犬瘟热病毒H基因、F基因和犬细小病病毒VP2基因的腺相关病毒质粒载体的构建 |
| 3.2.9 rAAV病毒的包装 |
| 3.2.10 rAAV滴度测定 |
| 3.2.11 Westernblot检测CDV-H、CDV-F、CPV-VP2蛋白的表达 |
| 3.2.12 细胞间接免疫荧光 |
| 3.2.13 小鼠免疫实验 |
| 3.2.14 小鼠血清的提取与分离 |
| 3.2.15 中和抗体水平检测 |
| 第4章 结果与分析 |
| 4.1 犬瘟热病毒与犬细小病毒的培养 |
| 4.2 抗原基因CDV-H、CDV-F、CPV-VP2的获得 |
| 4.3 携带抗原基因的rAAV质粒的构建 |
| 4.4 rAAV病毒的包装 |
| 4.5 rAAV滴度检测 |
| 4.6 抗原蛋白表达检测 |
| 4.7 细胞间接免疫荧光检测抗原蛋白在犬细胞中的表达情况 |
| 4.8 中和抗体水平检测 |
| 4.8.1 抗犬瘟热病毒中和抗体水平的检测 |
| 4.8.2 抗犬细小病毒中和抗体水平的检测 |
| 第5章 讨论 |
| 5.1 rAAV疫苗免疫效果分析 |
| 5.2 rAAV疫苗的优势 |
| 5.3 展望 |
| 第6章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（8）犬瘟热疫苗研究进展（论文提纲范文）
| 1传统疫苗 |
| 1.1灭活疫苗 |
| 1.2弱毒活疫苗 |
| 2基因疫苗 |
| 3亚单位疫苗 |
| 4病毒载体疫苗 |
| 4.1痘病毒载体疫苗 |
| 4.2腺病毒载体疫苗 |
| 4.3其他病毒载体疫苗 |
| 5小结 |
（9）犬瘟热、细小病毒病、腺病毒病（Ⅰ型）三联活疫苗的研制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 CD概况 |
| 1.2.1 CDV的基本结构和特征 |
| 1.2.2 CD的防控 |
| 1.3 CPV概况 |
| 1.3.1 CPV的基本结构和特征 |
| 1.3.2 CPV病的防控 |
| 1.4 CAV概况 |
| 1.4.1 CAV的基本结构和特征 |
| 1.4.2 CAV病的防控 |
| 1.5 本研究的目的和意义 |
| 2 CDV、CPV和CAV-I的分离、鉴定、致弱及免疫效力研究 |
| 2.1 实验材料与实验仪器 |
| 2.1.1 实验样品 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.1.3 实验仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 病毒分离 |
| 2.2.2 病毒鉴定 |
| 2.2.3 病毒致弱与免疫效力研究 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 病毒分离结果 |
| 2.3.2 病毒鉴定结果 |
| 2.3.3 病毒致弱及免疫效力研究结果 |
| 2.4 讨论 |
| 3 CD、CPV病和CAV-I病三联弱毒疫苗制备 |
| 3.1 实验材料与实验仪器 |
| 3.1.1 病毒和疫苗 |
| 3.1.2 实验动物 |
| 3.1.3 实验试剂 |
| 3.1.4 实验仪器 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 CDV、CPV和CAV-I三种病毒与稳定剂配比的研究 |
| 3.2.2 三联活疫苗安全性研究 |
| 3.2.3 三联活疫苗对怀孕母犬的安全性研究 |
| 3.2.4 三联活疫苗最小免疫剂量研究 |
| 3.2.5 三联活疫苗免疫持续期研究 |
| 3.2.6 三联活疫苗与各单苗的免疫效力比较 |
| 3.2.7 三联活疫苗与同类商品苗的比较研究 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 CDV、CPV和CAV-I三种病毒与稳定剂配比的研究结果 |
| 3.3.2 三联活疫苗安全性研究结果 |
| 3.3.3 三联活疫苗怀孕母犬的安全性研究结果 |
| 3.3.4 三联活疫苗最小免疫剂量研究结果 |
| 3.3.5 三联活疫苗免疫持续期研究结果 |
| 3.3.6 三联活疫苗与各单苗的免疫效力比较结果 |
| 3.3.7 三联活疫苗与市场销售的同类商品苗的比较研究结果 |
| 3.4 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
| 附件 |
四、犬瘟热、细小病毒、腺病毒三联弱毒疫苗（论文参考文献）
- [1]犬四种病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立[D]. 巨敏莹. 内蒙古农业大学, 2020(02)
- [2]威海地区主要毛皮动物常见病原体检测及微生态防治[D]. 赵国清. 甘肃农业大学, 2019(11)
- [3]犬瘟热预防生物制剂研究进展[A]. 郑颖,范泉水. 第18次全国犬业科技学术研讨会论文集, 2018
- [4]狂犬病疫苗株与减毒疫苗株的免疫及病理学研究[D]. 文兆海. 新疆农业大学, 2018(05)
- [5]犬细小病毒的分离鉴定及其抗体检测间接凝集试验的建立[D]. 唐毓. 东北农业大学, 2018(10)
- [6]犬瘟热病毒的分离鉴定及其抗体检测间接凝集试验的建立[D]. 苏瑞红. 东北农业大学, 2018(11)
- [7]携带有犬瘟热与犬细小病毒抗原的腺相关病毒载体疫苗的构建[D]. 王璐. 华中农业大学, 2018(01)
- [8]犬瘟热疫苗研究进展[J]. 薛向红,胡博,赵建军,刘昊,徐淑娟,闫喜军. 动物医学进展, 2015(10)
- [9]犬瘟热、细小病毒病、腺病毒病（Ⅰ型）三联活疫苗的研制[D]. 刘大飞. 东北林业大学, 2015(02)
- [10]犬细小病毒病研究进展[A]. 王凯民,姜焱,唐泰山,张常印. 第十五次全国养犬学术研讨会暨第七次全国小动物医学学术研讨会论文集, 2013