问：高效液相色谱原理
- 答：高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。
- 答：如何使用高效液相色谱(HPLC)
- 答：色谱法是一种分离技术，试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配过程。
其中的一相固定不动，称为固定相；
另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。
当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。
按两相状态分类
????气体为流动相的色谱称为气相色谱（GC）G-S & G-L
????液体为流动相的色谱称液相色谱（LC）L-S 和L-L
问：高相液相色谱法的原理，它的流动相的作用是什么
- 答：高效液相色谱原理大多是分配色谱，就是说样品被固定相（柱子填料）吸附以后，在流动相洗脱过程中，样品的极性不同，在流动相中溶解的浓度也不同，有的可以互溶，有的不容，有的有一定溶解度。就可以根据这个原理进行分离。
流动相的选择与注意事项1.流动相性质（1）液相色谱的流动相根据作用可分为底剂和洗脱剂。底剂决定基本的色谱分离情况，洗脱剂对某几个组分选择分离。流动相组成改变，极性改变，可显著改变组分分离状况；（2）亲水性固定液常采用疏水性流动相，即流动相的极性小于固定相的极性，称为正相液液色谱法，极性柱也称正相柱。正相柱的底剂用低极性溶剂，洗脱剂则选用极性较强的针对性溶剂。（3）若流动相的极性大于固定液的极性，则称为反相液液色谱，非极性柱也称为反相柱。组分在两种类型分离柱上的出峰顺序相反。反相柱通常以水为流动相的主体，再加入不同配比的有机溶剂做调节剂。 - 答：高效液相色谱原理大多是分配色谱，就是说样品被固定相（柱子填料）吸附以后，在流动相洗脱过程中，样品的极性不同，在流动相中溶解的浓度也不同，有的可以互溶，有的不容，有的有一定溶解度。就可以根据这个原理进行分离。
- 答：原理简单来说就是利用流动相带动样品在柱子的固定相的不断吸附和解析，由于不同的物质与固定相的吸附解析能力不同，从而达到把样品分离的作用！
流动相主要起到运载样品的作用，同时他和固定相的的作用也起到分离的作用 - 答：不同的样品洗脱体积是不同的，以保留时间计算，大概在7min-15min出峰为宜，当然这是对单一样品来说的，如果目标峰或干扰峰较多，则首先要考虑的是分离度。这样计算的话（1ml/min的流速），一个样品大概需要10-20ml的流动相，另外色谱柱的平衡也需要消耗流动相。
问：高效液相色谱法的优缺点
- 答：优点：分离效率高，选择性好，检测灵敏度高，操作自动化，应用范围广；
与气相色谱法相比具有的优点：不受试样的挥发性和热稳定性限制，应用范围广；流动相种类多，可通过流动相的优化达到高的分离效率；一般在啊室温下分析即可，不需高柱温。
缺点：分析成本高，液相色谱仪价格及日常维护费用贵，分析时间一般比气相长。 - 答：LC用于定性，GC用于定量。LC需要天天清洗，GC出现故障才需要
- 答：这个问题概念比较大，建议你上“色谱世界”网站看看。“学习培训”栏目有非常详细的介绍。
问：高效液相色谱的液相色谱理论
- 答：发展简况
液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相，称为经典液相色谱法，此方法柱效低、时间长（常有几个小时）。高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。
它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱法(High Pressure Liquid Chromatography，HPLC)。又因分析速度快而称为高速液相色谱法(High Speed Liquid Chromatography，HSLP)。也称现代液相色谱。